Pullulanase

Pullulanase ialah enzim maltosa-kanji teraruh-menyahcabang daripada Klebsiella pneumoniae. Rembesan bergantung kepada produk daripada sekurang-kurangnya lapan gen rembesan yang terletak pada kedua-dua belah gen pullulanase (pulA) dalam kromosom Klebsiella (Kornacker dan Pugsley, 1990b). Pullulanase boleh diekspresikan dan dirembeskan dalam E. coli dengan menyediakan ekspresi serentak gen rembesan pullulanase (d'Enfert et al., 1987). Protein wujud sebagai perantaraan terikat permukaan sel yang terdedah sebelum dilepaskan ke medium pada set-pada fasa pertumbuhan pegun (Michaelis et al., 1985). Maklumat eksport dan rembesan nampaknya berada di bahagian terminal N-pullulanase (Kornacker dan Pugsley, 1990a). Protein hibrid di mana kawasan terminal C-pullulanase telah digantikan oleh masing-masing -laktamase dan alkali fosfatase (PhoA) matang, dengan itu bercantum ke terminal aa 832 N-a pertama pullulanase, ditunjukkan sebagai permukaan sementara-diekspresikan bersama-sama dengan gen yang ditarik bersama-sama dengan koloid E. (Kornacker dan Pugsley, 1990b). Walaupun, kedua-dua enzim dipaparkan di permukaan, PhoA kurang cekap terdedah, yang mungkin disebabkan oleh struktur sekunder dan tertier yang tidak serasi bagi protein penumpang heterolog.